几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较

作者：秦慧; 刘霆; 柳斌; 宋鑫; 黄欣; 杨金亮; 赵霞; 魏于全

来源：中国实验血液学杂志, 2006, (01): 168-172.

• 蛋白质组
• 双向凝胶电泳
• 蛋白质检测
• 考马斯亮蓝染色法
• 银染

本研究对蛋白质染色法进行比较和分析,以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法。实验采用2-D电泳分离急性早幼粒白血病细胞株NB4的全蛋白及1-D电泳分离蛋白质分子量标准物,从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度,比较了传统考马斯亮蓝染色法、胶体考马斯亮蓝染色法、改良考马斯亮蓝染色法和银染法4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响,探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素。结果显示,银染检测灵敏度最高,但质谱鉴定相容性差,鉴定率近10%;改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高,可达4ng/spot,质谱鉴定率可接近55%。结论:改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高,与质谱兼容好,能满足蛋白质组研究需要。

• 单位
  生物治疗国家重点实验室; 四川大学华西医院