非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较

作者：肖琦; 蒋彩霞; 史慧; 赵霞玲; 钱雯娴; 朱家平; 张冯禧; 温立斌; 汪伟; 何孔旺^*

来源：江苏农业科学, 2021, 49(02): 119-124.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2021.02.022

• 非洲猪瘟病毒
• 检测
• 荧光定量PCR
• 灵敏性
• 稳定性
• 敏感性

为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10～102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10～102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies。对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%～99.03%。其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988～0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之。本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据。

• 单位
  农业部; 江苏省农业科学院; 西藏农牧学院