基于CaSR表达及AKT磷酸化水平的花旗泽仁改善胰岛素抵抗作用机制

作者：张义; 于鹏洋; 郑思琦; 孙丽英; 葛鹏玲^*

来源：中成药, 2021, 43(01): 44-49.

• 花旗泽仁
• 胰岛素抵抗
• CaSR
• AKT
• L02肝细胞

目的基于CaSR表达及AKT磷酸化水平考察花旗泽仁改善胰岛素抵抗的作用机制。方法采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立IR L02肝细胞模型,并通过葡萄糖消耗实验对细胞模型进行鉴定。采用免疫荧光法和qRT-PCR技术检测CaSR表达的细胞定位以及CaSR mRNA表达,同时采用Western blot技术检测CaSR蛋白、磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达。结果高浓度胰岛素诱导后的L02肝细胞模型葡萄糖消耗量和摄取率明显下降(P<0.01)。免疫荧光实验结果表明,模型对照组的CaSR分布较稀疏,相对应的,给予花旗泽仁后的CaSR分布较密集。通过qRT-PCR实验发现,模型对照组的CaSR mRNA表达显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,花旗泽仁组、阳性对照组中CaSR mRNA表达明显上调(P<0.01)。同时Western blot检测结果表明,模型对照组的CaSR和磷酸化AKT(Thr308和Ser473)蛋白表达显著下降(P<0.01),与模型对照组比较,花旗泽仁组、阳性对照组中CaSR和磷酸化AKT(Thr308和Ser473)蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论该实验证明了花旗泽仁通过影响PI3K通路改善胰岛素抵抗,可能与通过调节CaSR,激活PI3K/AKT信号通路AKT上的2个(Thr308,Ser473)磷酸化位点的蛋白表达有关。

• 单位
  基础医学院; 黑龙江中医药大学