铁苋菜对RAW 264.7细胞NLRP3及炎症因子表达的影响

作者:尕玉; 樊艺萌; 王惠茹; 魏媛媛; 张艳楠; 郝智慧*
来源:中国兽医学报, 2023, 43(05): 1019-1028.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.05.25

摘要

利用中药网络药理学结合脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞建立的炎症模型,共同探讨铁苋菜(AAL)治疗溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。基于文献研究并结合OMIM、Drugbank、TDD数据库筛选得到AAL以及UC相关靶标,进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。将RAW 264.7细胞分为空白对照组、LPS组、阳性药物组、铁苋菜高、中、低剂量组(900,800,700 mg/L)。观察高、中、低剂量AAL对RAW 264.7的细胞活力和细胞凋亡的影响,同时采用qRT-PCR和Western blot检测高、中、低剂量AAL对NLRP3、GSDMD、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18、MUC-2、OCLN的mRNA与蛋白表达水平的影响。网络药理学结果显示AAL治疗UC主要涉及凋亡过程的负调控及PI3K-Akt信号通路等过程。体外试验显示700,800,900 mg/L AAL显著抑制LPS处理的巨噬细胞的活力,减少细胞凋亡,降低NLRP3、GSDMD、Caspase-1和ASC mRNA和蛋白的表达。以上结果表明AAL可通过抑制NLRP3/Caspase-1信号通路,减少炎症因子IL-18和IL-1β的分泌,从而减轻LPS诱导的炎症,治疗UC。

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