干扰素调节因子1调控线粒体自噬参与小鼠肝缺血再灌注损伤

作者：王振; 李世朋; 于瑶; 何金丹; 杜晨阳; 宋虎; 张海明; 张建军^*

来源：中华器官移植杂志, 2016, 37(10): 614-619.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2016.10.008

• 干扰素调节因子-1
• 线粒体自噬
• 缺血再灌注损伤

目的探讨干扰素调节因子-1(IRF-1)调控线粒体自噬对小鼠肝缺血再灌注损伤的影响。方法选择健康雄性C57BL/6小鼠建立活体小鼠肝缺血再灌注损伤模型, 用随机数字表法分为假手术组(sham)和缺血再灌注组(IR), 每组6只。血生化检测两组小鼠血清ALT、AST变化, 罗丹明123染色(Rhodamine 123)法检测肝细胞线粒体损伤情况, HE染色观察肝组织病理学改变, TUNEL法检测肝细胞凋亡情况。Western blot检测IRF-1、Nix、LC3和Caspase-3蛋白表达。AML12细胞系建立离体肝细胞缺血再灌注损伤模型, 分为siRNA-NC组和siIRF-1组。PI染色法检测AML12细胞凋亡情况, 免疫荧光观察AML12细胞内自噬体形成情况, Western blot检测IRF-1、Nix、LC3和Bax蛋白表达。结果与假手术组比较, 缺血再灌注组小鼠血清ALT、AST明显升高(P<0.0001);罗丹明123染色法见缺血再灌注组线粒体膜电位明显下降, 线粒体损伤严重;病理学检查见缺血再灌注组肝细胞肿胀、脂肪变性, 肝窦狭窄, 中性粒细胞浸润和片状坏死, 肝组织结构破坏严重;TUNEL法检测见IR组肝细胞凋亡率明显增高(P<0.0001);Western blot检测显示, 缺血再灌注组IRF-1、Caspase-3蛋白表达水平明显高于假手术组, Nix、LC3Ⅱ表达水平明显低于假手术组。PI染色法示, SiRNA-NC组细胞凋亡率明显高于siIRF-1组(P<0.0001)。免疫荧光示SiRNA-NC组细胞内自噬体个数明显低于siIRF-1组(P<0.0001);Western blot检测显示SiRNA-NC组IRF-1、Bax蛋白表达水平明显高于siIRF-1组, Nix、LC3Ⅱ表达水平明显低于siIRF-1组。结论 IRF-1加重小鼠肝缺血再灌注损伤, 其机制可能与IRF-1抑制线粒体自噬, 促进肝细胞凋亡有关。抑制IRF-1表达能够提高线粒体自噬, 对肝缺血再灌注起到保护作用。

• 单位
  天津医科大学; 天津市第一中心医院