艾司氯胺酮通过调控miR-148a-3p/KLF4通路减轻脊髓损伤大鼠的炎症反应

作者：徐乾; 梁威; 李鹏; 彭晓红; 余丹^*

来源：临床麻醉学杂志, 2022, 38(09): 965-970.

• 脊髓损伤
• 艾司氯胺酮
• 微小RNA-148a-3p
• Kruppel样因子4
• 神经功能

目的 通过构建脊髓损伤大鼠模型，探讨艾司氯胺酮对脊髓损伤和微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)/Kruppel样因子4(KLF4)通路的影响。方法 选择SPF级成年雌性SD大鼠48只，7～9周龄，体重215～255 g。将大鼠随机分为四组：假手术组(S组)、脊髓损伤组(SCI组)、艾司氯胺酮50 mg/kg组(E组)和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg组(EI组),每组12只。S组予去除椎板处理，SCI组仅建立脊髓损伤大鼠模型，E组和EI组分别于建模后每日腹腔注射艾司氯胺酮50 mg/kg和艾司氯胺酮50 mg/kg+miR-148a-3p抑制剂5 mg/kg,连续注射7 d。于建模后1、4、7、10 d采用斜板实验计算最大倾斜角度、行为学实验计算运动功能BBB评分评估大鼠脊髓神经功能。建模后10 d BBB评分后处死大鼠，采用ELISA法检测脊髓白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)浓度，qPCR法检测脊髓miR-148a-3p、KLF4 mRNA表达量，Western blot法检测脊髓神经元核抗原(NeuN)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、KLF4蛋白含量，HE染色法观察损伤处脊髓病理情况。结果 与S组比较，SCI组、E组和EI组建模后1、4、7、10 d最大倾斜角度明显减小、BBB评分明显降低，脊髓IL-1β和MDA浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量、GFAP和KLF4蛋白含量明显升高，脊髓SOD浓度、NeuN蛋白含量明显降低(P<0.05)。与SCI组比较，E组和EI组建模后4、7、10 d最大倾斜角度明显增大、BBB评分明显升高，脊髓IL-1β和MDA浓度、GFAP蛋白含量明显降低，脊髓SOD浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量、NeuN和KLF4蛋白含量明显升高(P<0.05)。与E组比较，EI组建模后4、7、10 d最大倾斜角度明显减小、BBB评分明显降低，脊髓IL-1β和MDA浓度、GFAP蛋白含量明显升高，脊髓SOD浓度、miR-148a-3p和KLF4 mRNA表达量明显降低(P<0.05)。S组脊髓结构完整，细胞间排列紧密；SCI组脊髓结构被破坏，产生多个空洞；E组脊髓结构逐渐恢复，细胞排列较为整齐，空洞数量明显减少；EI组脊髓结构恢复较慢，细胞排列较为松散，仍有少量空洞。结论 艾司氯胺酮通过调控miR-148a-3p/KLF4通路，抑制氧化应激反应和炎症反应，升高脊髓miR-148a-3p、KLF4 mRNA表达量和NeuN和KLF4蛋白含量，改善大鼠行为学和脊髓神经功能，保护神经组织和脊髓结构，减缓脊髓损伤。