沉默XIST通过上调miR-488-3p抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的顺铂耐药性

作者：吴莉敏; 吴莉娜^*; 付丽丽; 李宝娣; 刘婷婷; 寇卫华; 李荣

来源：现代医学, 2019, 47(04): 415-421.

• 宫颈鳞状细胞癌细胞
• 顺铂耐药性
• 长链非编码RNA XIST
• 微小RNA-488-3p
• RNA拉下实验

目的:探索长链非编码RNA XIST对宫颈鳞状细胞癌细胞顺铂耐药性的作用及机制。方法:建立宫颈鳞状细胞癌细胞顺铂耐药系CASKI/cDDP;构建沉默XIST的慢病毒载体(si-XIST)及miR-488-3p沉默载体miR-inhibitor;将si-XIST单独稳定转入CASKI/cDDP细胞或将si-XIST与miR-inhibitor共转入CASKI/cDDP细胞,qRT-PCR检测XIST、miR-488-3p水平变化; MTT法检测细胞存活率变化,蛋白质印迹法检测多药耐药基因1(MDR1)表达变化,RNA拉下实验确定miR-488-3p与XIST的结合关系。结果:与CASKI相比,CASKI/cDDP中XIST表达升高(P <0. 05); si-XIST转染CASKI/cDDP细胞48 h后,XIST的水平显著下调(P <0. 05)、细胞的存活率下降(P <0. 05)、MDR1表达水平下降(P <0. 05)。CASKI/cDDP细胞XIST沉默可增加miR-488-3p水平(P <0. 05);生物信息学预测宫颈癌关键标志物microRNA-488-3p与XIST结合;RNA拉下实验确认XIST直接结合miR-488-3p。CASKI/c DDP细胞共转染si-XIST与miR-488-3p-inhibitor;miR-488-3p-inhibitor部分逆转si-XIST的功能,提高CASKI/c DDP在顺铂处理下的细胞活性(P <0. 05)。结论:沉默XIST通过上调miR-488-3p抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的顺铂耐药性。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院