24株鸡源丁酸梭菌的分离鉴定及耐药基因与毒力基因携带情况

作者：范伟祥; 曹艳丽; 崔璐璐; 逯晓寒; 林海^*; 孙淑红^*

来源：微生物学报, 2021, 61(01): 115-126.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20200110

• 丁酸梭菌
• 药敏试验
• 耐药基因
• 梭菌毒素基因
• 肉毒毒素基因

【目的】旨在对鸡源丁酸梭菌进行分离鉴定与安全性评估。【方法】利用厌氧培养方法对源自汶上芦花鸡与SPF鸡粪便样品进行丁酸梭菌的分离与纯化,挑选可疑菌落进行微生物质谱鉴定,进一步通过16S r RNA基因测序进行鉴定,16S r RNA测序结果与NCBI核苷酸数据库中丁酸梭菌的16S r RNA序列进行同源性分析;同时,进行所有分离株对氧氟沙星、头孢吡肟等9种药物的药敏试验,利用PCR方法进行mef A等23种耐药基因扩增,基于益生菌安全要求对样品进行alpha等4种梭菌毒素基因以及type A等4种肉毒毒素基因的测定。【结果】共分离鉴定了24株丁酸梭菌。24株均对氧氟沙星等7种抗生素表现为敏感,L-1、L-6、L-12仅对新霉素表现为中介,L-19仅对头孢吡肟表现为中介。全部菌株的mef A等16种耐药基因结果全部为阴性,sul2、flor、blaTEM 3种耐药基因全部呈阳性,tet C携带率为79.2%,cml A携带率为45.8%,blaOXA携带率为37.5%,aad B携带率为12.5%,qnr A携带率为4.2%。PCR结果显示所有分离菌株的alpha、beta、epsilon、iota等4种梭菌毒素基因携带率0%。全部分离菌株均未携带type A、type B、type E、type F 4种肉毒毒素基因。【结论】结果表明,从未饲喂抗生素和丁酸梭菌的汶上芦花鸡与SPF鸡群中获得的24株丁酸梭菌分离株达到预期的安全性要求,可作为益生添加菌的筛选参考株。

• 单位
  动物科技学院; 山东农业大学