桑黄素对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠的保护作用研究

作者：杨莉; 郏建臣; 王玉华; 刘红玲; 申振亚

来源：中国免疫学杂志, 2019, 35(20): 2438-2445.

• 桑黄素
• 急性肺损伤
• PI3K/Akt/NF-κB信号通路
• 炎症反应

目的:探究桑黄素(morin)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)模型大鼠的作用机制及影响。方法:将大鼠分为Control、LPS、morin(10 mg/kg)、morin(20 mg/kg)及morin(40 mg/kg)组,利用LPS建立ALI模型。桑黄素处理模型大鼠后,称量各组大鼠右肺干湿重,计算肺干湿重比值,并利用HE染色检测肺损伤情况,Tunnel检测肺组织凋亡细胞百分比,ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)浓度。不同剂量桑黄素处理大鼠原代肺巨噬细胞,确定用药浓度。将大鼠原代巨噬细胞分为Control、LPS、morin(10μmol/L)、morin(20μmol/L)、morin(50μmol/L)及morin(50μmol/L)+胰岛素样生长因子(IGF-1)组,利用LPS建立ALI模型。桑黄素处理细胞后,RT-PCR检测细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平,免疫印迹检测磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、磷酸化丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(p-IκBα)及核因子κB p65(NF-κB p65)在各组大鼠组织及原代巨噬细胞中的表达。结果:与Control组比较,LPS组大鼠肺干湿重比值显著升高,肺泡中充满红细胞及蛋白渗出物;与LPS组比较,morin(10 mg/kg)、morin(20 mg/kg)及morin(40 mg/kg)组中大鼠肺干湿重比值显著降低,肺泡中红细胞及蛋白渗出物显著减少。桑黄素可降低ALI大鼠组织凋亡细胞百分比及Bax和cleaved Caspase-3的表达,升高Bcl-2的表达。与Control组比较,LPS组大鼠组织肺泡中大量炎性细胞浸润,TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度显著升高。与LPS组比较,morin(10 mg/kg)、morin(20 mg/kg)及morin(40 mg/kg)组中炎性细胞浸润显著减少,TNF-α、IL-6和IL-1β的浓度显著降低。此外,与Control组比较,LPS组大鼠肺组织中SOD浓度显著下降,MDA浓度显著上升。与LPS组比较,morin(10 mg/kg)、morin(20 mg/kg)及morin(40 mg/kg)组中SOD浓度显著上升,MDA浓度显著下降。桑黄素可降低ALI大鼠肺组织中p-PI3K、p-Akt、p-IκBα和NF-κB p65表达水平。桑黄素细胞用药浓度设置为10、20、50μmol/L。与Control组比较,LPS组大鼠原代肺巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著升高。与LPS组比较,morin(10μmol/L)组无显著差异;morin(20μmol/L)及morin(50μmol/L)组中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著降低。与morin(50μmol/L)组比较,morin(50μmol/L)+IGF-1组中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平显著升高。同时,与Control组比较,LPS组大鼠原代肺巨噬细胞中p-PI3K、p-Akt、p-IκBα和NF-κB p65表达水平显著升高。与LPS组比较,morin(10μmol/L)、morin(20μmol/L)及morin(50μmol/L)组中p-PI3K、p-Akt、p-IκBα和NF-κB p65表达水平显著降低。与morin(50μmol/L)组比较,morin(50μmol/L)+IGF-1组中p-IκBα和NF-κB p65的表达水平显著升高。结论:桑黄素可通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路减轻ALI对模型大鼠的影响。

• 单位
  河南科技大学第一附属医院