SARS冠状病毒PUP5蛋白的表达、纯化及鉴定

作者：王红霞; 孟庆文; 刘永刚; 施建忠; 孔宪刚; 冉多良; 吴东来

来源：中国预防兽医学报, 2006, (04): 457-460+465.

• SARS冠状病毒
• PUP5蛋白
• 表达 SARS-CoV
• PUP5 protein
• expression

经RT-PCR扩增了SARS冠状病毒(SARS-CoV)BJ01株的PU5基因(putativeuncharacterizedgene5)的cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,命名为pGEX-PU5,测序正确后将阳性质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达的融合蛋白命名为pGEX-PUP5,并用GlutathioneSwpharoseTM4B亲和层析柱对表达产物进行纯化,然后用PreScissionTMProtease酶对融合蛋白进行解离,获得PUP5蛋白,用抗SARS-CoV卵黄抗体IgY和GST-tag单克隆抗体分别对表达的目的蛋白做Westernb...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 新疆农业大学