绿色荧光蛋白基因银耳表达载体构建及表达

作者：孙淑静; 郑域茹; 谢宝贵; 游凯; 胡方平

来源：中国农学通报, 2008, (04): 42-46.

• 银耳
• 绿色荧光蛋白基因
• 表达 Tremella fuciformis
• EGFP gene
• expression

以银耳芽孢为材料,由载体pEGFP、pCAMBIA1300经过HindIII和EcoRⅠ双酶切、连接、转化,重组质粒酶切验证,成功构建了由双孢蘑菇gpd启动子调控EGFP基因的银耳真核表达载体,命名pCB-BEGFP。采用电击转化法将携带EGFP基因的银耳表达载体pCB-BEGFP转化到银耳芽孢。提取4个转化子基因组DNA,用EGFP基因特异引物PCR扩增,电泳结果表明有与EGFP基因大小一致的特异带出现;荧光显微镜观察在再生培养基上的转化子可看到很强的绿光;其中一个转化子蛋白SDS-PAGE电泳,结果发现在大约27kD处有一明显的蛋白条带出现,与预期的蛋白分子量相近。以上结果证明EGFP基因...

• 单位
  福建农林大学