基于Hsp90 ATPase活性的抑制剂筛选模型研究

作者：陈俊杰; 郭秋菊; 贺晓萌; 杨世新; 陈澄; 张连茹

来源：厦门大学学报(自然科学版), 2010, (05): 711-716.

• pGEX-4T-1
• Hsp90
• ATPase活性 pGEX-4T-1
• Hsp90
• ATPase activity

热休克蛋白90(Heat shock protein,Hsp90)作为分子伴侣,参与调控肿瘤细胞多条信号通路,对肿瘤细胞生长有重要作用.以pGEX-4T-1为载体,构建了Hsp90表达载体于宿主大肠杆菌中表达.通过孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,测定异源表达的Hsp90 ATPase活性.实验得出Hsp90对ATP的米氏常数(Km)为369.1μmol/L,在Hsp90和ATP浓度分别为0.18,1 mmol/L时转换效率常数(kcat)为1.6 min-1,最大反应速率(Vmax)为1.0μmol/(L.min).基于该方法,建立Hsp90 ATPase活性抑制剂筛选模型,以Geldanamy...

• 单位
  厦门大学