摘要
沙门氏菌(Salmonella,SALM)是重要的食源性致病菌之一,常存生在人体和动物肠道内,诱发食物中毒,因此实现快速检测对食品安全监测至关重要。本研究将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上来,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T (ThT)荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA的浓度对数与486 nm处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y =2.101x + 2.8723 (R2 = 0.9925),线性范围为17 fg/μL-1.7 ng/μL。根据试验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。
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单位河北旅游职业学院; 河北大学附属医院; 河北农业大学