利用家蚕杆状病毒表达系统表达人γ干扰素及产物的抗病毒活性检测

作者：曾振; 李家磊; 刘兴健; 唐平; 李轶女; 张志芳; 沈兴家; 易咏竹^*

来源：蚕业科学, 2021, 47(03): 240-246.

DOI：10.13441/j.cnki.cykx.2021.03.005

• 人γ扰素
• 杆状病毒表达系统
• 家蚕
• 抗病毒活性

干扰素-γ(IFN-γ)是免疫反应中重要的免疫调节因子,对多种免疫细胞具有激活作用。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中高效表达具有活性的人γ干扰素(hIFN-γ),首先根据家蚕密码子偏好性对hIFN-γ的编码基因进行优化合成,将优化合成后的序列克隆到杆状病毒转移载体pBR中,然后与orf1629基因缺失的失活拯救型杆状病毒BmBacmid共转染BmN细胞,获得重组病毒reBmBac-hIFN-γ,最后利用获得的重组病毒感染家蚕并收获表达产物。采用微量细胞病变抑制法,在Vero/VSV-GFP系统中检测到重组hIFN-γ的效价达到(3.69±2.02)×106 IU/mL。此外,重组hIFN-γ可以抑制猪蓝耳病病毒(PRRSV)在Marc-145细胞中的增殖。上述结果为利用家蚕生物反应器高效生产具有活性的人γ干扰素奠定了试验基础。

• 单位
  中国农业科学院生物技术研究所; 中国农业科学院蚕业研究所; 江苏科技大学