牛小肠碱性磷酸酶部分性质研究

作者：余同; 张营; 赵欣平; 高举; 杨梅强

来源：四川大学学报(自然科学版), 2009, 46(06): 1838-1844.

• 牛小肠
• 碱性磷酸酶
• 分离纯化
• 酶学性质
• 金属离子

用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、EAE-32柱层析和Sephadex G-150凝胶过滤,从牛小肠中分离纯化出牛小肠碱性磷酸酶(BIAP).提纯倍数为50.69,比活力为48.87U/mg蛋白.酶液经SDS-PAGE呈现单一条带,且不含DNA核酸酶.该酶催化对硝基苯磷酸二钠(p-NPP)水解反应的最适pH值为9.7,pH小于6.5大于11.5均不稳定;最适温度为45℃,高于50℃不稳定.45℃,pH 9.7时K_m值为0.29mmol/L,最大反应速度(V_(max))为4.6μmol/(L·min).利用SDS-PAGE测定酶亚基的分子量为66 kD.Mg~(2+)、Mn~(2+)和Ca~(2+)对酶有不同程度的激活作用,Zn~(2+)和EDTA对酶有抑制作用.随着Mg~(2+)、Zn~(2+)和EDTA浓度增加,270nm处紫外吸收值增加.

• 单位
  生命科学学院; 四川大学; 生物资源与生态环境教育部重点实验室