幽门螺杆菌分子伴侣GroEL相互作用蛋白分析

作者：翟康乐; 宫雅楠; 肖迪; 孙路; 何利华; 房梦飏; 尤元海; 王磊; 闫笑梅; 张建中^*

来源：微生物学报, 2023, 63(05): 1970-1981.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20230111

• 幽门螺杆菌
• 分子伴侣GroEL
• 免疫共沉淀
• 质谱

【目的】获得幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP) GroEL结合蛋白质组构成谱，为进一步探究GroEL及其与相互作用蛋白在HP致病机制中的作用提供新思路。【方法】在构建HP GroEL原核表达重组大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3)(pET-28a(+)-groEL)基础上，纯化带有His标签的GroEL蛋白，与HP全菌蛋白提取液共孵育后，利用Protein G磁珠和抗His标签抗体免疫沉淀法对复合物进行捕获，然后对复合物中GroEL及其结合的蛋白质进行质谱法鉴定，根据主要功能对其进行分类，并完成蛋白质相互关系网络分析。【结果】对GroEL蛋白捕获成分进行分析，共鉴定出59种可能与GroEL结合的蛋白质，其中包括19种代谢酶类(KatA、GltA和AhpC等参与氧化还原相关酶类7种，PepA、RocF和HtrA等肽酶5种，以及2种参与脂肪代谢酶、2种参与ATP合成酶、2种尿素酶和HP17＿08079蛋白等)、15种外膜蛋白(黏附素BabA、SabA、HapA及其他膜蛋白等)、8种转录翻译相关蛋白(Tuf、RpoBC等)、5种分子伴侣(DnaK、GroES等)、3种细胞毒素相关蛋白(CagA等)、3种氧化还原相关蛋白(TrxA等)、2种信号转导蛋白(Tlp B、TlpD)和4种功能尚不明确蛋白。蛋白质相互关系网络分析发现，可形成多个分簇，并以GroEL为网络的中心节点。外膜蛋白，特别是重要黏附素BabA、SabA、HapA等与GroEL的广泛关联，提示GroEL可能在HP与宿主胃黏膜上皮细胞相互作用中发挥重要作用。【结论】HP中GroEL结合蛋白质谱广泛，功能涉及HP代谢、转录翻译、氧化还原和黏附等，并参与HP生存适应、定殖及致病过程。GroEL有望成为一种新的研究HP致病性及发展感染干预策略的重要靶点。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所