金荞麦水提物通过调控RIG-Ⅰ信号通路与细胞自噬抑制甲型流感病毒H1N1的复制

作者：张哲雯; 冯燕; 徐昌平; 高见; 吴巧凤^*

来源：中药药理与临床, 2022, 38(01): 103-110.

DOI：10.13412/j.cnki.zyyl.2022.01.006

• 金荞麦水提物
• 甲型流感病毒
• 转录组测序
• 差异表达基因
• RIG-Ⅰ信号通路
• 细胞自噬

目的:探讨金荞麦水提物体外抗甲型流感病毒H1N1的效果及其作用机制。方法:考察金荞麦水提物抗H1N1感染犬肾(Madin-Darby canine kidney, MDCK)细胞的活性及作用方式；转录组测序(RNA-sequencing, RNA-seq)分析金荞麦水提物处理后感染细胞的基因差异表达，筛选与抗病毒相关的信号通路；蛋白质印迹法(Western blot, WB)检测LC3 Ⅱ的表达水平，荧光显微镜观察自噬流，分析金荞麦水提物对感染细胞自噬水平的影响。结果:金荞麦水提物具有良好的抑制细胞内H1N1复制的活性，细胞对MDCK 1.25 mg/mL抑制率为51.02%,5 mg/mL抑制率为98.22%。与模型对照组比较，金荞麦水提物处理感染细胞后，引起2 682个基因差异表达。KEGG通路富集分析表明，差异表达基因富集在RIG-Ⅰ和细胞自噬信号通路。金荞麦水提物1.25、2.5、5 mg/mL处理的感染细胞中，LC3 Ⅱ蛋白表达及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值显著低于模型对照组(P<0.01),且出现自噬溶酶体。结论:金荞麦水提物具有显著体外抗H1N1的活性，其作用机制与对宿主细胞RIG-Ⅰ信号通路的调控，以及抑制感染诱导的细胞自噬相关。

• 单位
  浙江省疾病预防控制中心; 浙江中医药大学