Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5抑制巨噬细胞焦亡的作用机制

作者：赵广建; 刘大男^*; 周博; 王尧

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(25): 4005-4012.

• 巨噬细胞
• Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5
• FNDC5
• NF-κB
• NLRP3
• 细胞焦亡

背景：Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5(fibronectin type Ⅲ domain-containing protein 5,FNDC5)是一种肌肉因子，具有调节糖脂代谢、抗炎、抗氧化及改善胰岛素抵抗等功能，并且具有调节多种细胞焦亡的能力。目的：探讨FNDC5对巨噬细胞焦亡的作用及潜在机制。方法：(1)构建FNDC5基因过表达和沉默慢病毒载体，将慢病毒载体转染至THP-1细胞株，通过观察细胞绿色荧光表达、qPCR和Western blot验证转染效果。(2)佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，通过氧化性低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)构建巨噬细胞焦亡模型，分组：NC组、ox-LDL组、ox-LDL+MOCK1组、ox-LDL+Ov-FNDC5组、ox-LDL+MOCK2组和ox-LDL+shFNDC5组。(3)采用Hoechst 33342/PI荧光双染和乳酸脱氢酶释放实验评估细胞焦亡程度，采用qPCR和Western blot检测相关分子mRNA和蛋白表达水平，采用ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β和白细胞介素18释放水平。结果与结论：与ox-LDL+MOCK1组相比，过表达FNDC5可显著降低巨噬细胞焦亡率以及乳酸脱氢酶、白细胞介素1β、白细胞介素18释放水平，显著抑制NF-κB p65、NF-κB p50、NLRP3、ASC、Caspase-1及GSDMD的mRNA表达，显著抑制NF-κB p65、NF-κB p50、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1及GSDMD-N的蛋白表达；与ox-LDL+MOCK2组相比，沉默FNDC5则出现相反结果。结果表明：FDNC5可能通过抑制NF-κB/NLRP3通路缓解巨噬细胞焦亡。

• 单位
  贵州医科大学