摘要
目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在气道黏液高分泌中的作用及机制。方法用8%香烟提取物(CSE)处理人气道A549细胞后,分别给予HSP70抗体阻断剂、c-Jun氨基末端激酶(JNK)特异性抑制剂SP600125进行干预。实验共分4组:空白对照组(无血清培养基培养)、CSE刺激组(加入8%CSE培养24 h)、HSP70抗体组(HSP70单抗预处理30 min,再给予8%CSE继续培养24 h)、SP600125组(加入JNK特异性抑制剂SP600125 30μmol/L预处理30 min,再给予8%CSE继续培养24 h)。酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组中MUCSAC蛋白的相对表达量,逆转录-PCR检测MUC5AC mRNA的相对表达量,Western印迹法检测HSP70水平,Western印迹法检测JNK及激活蛋白-1(主要为c-Jun)磷酸化水平。结果 CSE刺激组细胞MUCSAC蛋白、MUCSAC mRNA、P-JNK、c-Jun、P-c-Jun相对表达量(0.52±0.07、0.64±0.11、0.73±0.06、0.67±0.10、0.67±0.09)均显著高于空白对照组(0.26±0.10、0.28±0.06、0.30±0.05、0.30±0.08、0.36±0.08)、HSP70抗体组(0.30±0.12、0.29±0.09、0.34±0.06、0.47±0.19、0.39±0.13)和SP600125组(0.38±0.06、0.31±0.14、0.39±0.04、0.44±0.12、0.48±0.11),HSP70(0.75±0.09)也显著高于空白对照组(0.29±0.03)、HSP70抗体组(0.40±0.11)(均P<0.05)。结论 HSP70可能通过JNK/激活蛋白-1信号通路上调气道A549细胞中MUC5AC的表达。
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