摘要
目的 筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白 (core)反式激活的新型靶基因。方法 以HCV核心蛋白表达质粒pcD NA3 1(- ) core转染HepG2细胞 ,以空载体 pcDNA3 1(- )为平行对照 ,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。分析筛选出来的基因 ,其中之一与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性。通过序列同源性搜索比对及电子拼接 ,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列 ,确定新型基因序列。从转染 pcDNA3 1(- ) core的HepG2细胞提取总RNA ,以RT PCR技术扩增获得该新基因的全长序列 ,并对...
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单位解放军第302医院