牛源荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其种特异性基因的序列分析

作者：阚威; 王谢忠; 李兆才; 蔡金山; 王文勇; 马艳萍; 韩蓉; 周继章^*; 王云平^*

来源：中兽医医药杂志, 2019, 38(04): 18-22.

DOI：10.13823/j.cnki.jtcvm.2019.04.005

• 牛
• 多杀性巴氏杆菌
• 16S rRNA
• kmt1
• 荚膜
• A型
• 多重PCR

从病死牛组织中分离到4株致病菌,编号分别为P1、P2、P3、P4。经菌落形态学观察、培养特性、生化反应和小鼠毒力试验,初步鉴定为多杀性巴氏杆菌。参考多杀性巴氏杆菌16S rRNA和种特异性kmt1基因以及荚膜血清型基因A(capA)、B(capB)、D(capD)、E(capE)和F(capF)合成引物,利用多重PCR扩增16S rRNA、kmt1和荚膜血清型基因,对PCR产物测序并进行同源性分析。结果显示,P1～P4都扩增出了16S rRNA、kmt1和荚膜血清型A型基因的特异性目的条带;P1～P4的16S rRNA、kmt1、A型基因序列与Genbank数据库中的多杀性巴氏杆菌相应序列具有高度同源性(>99.0%);P2、P3、P4间的16S rRNA基因同源性较高(>99.0%),而P1与其它3株(P2～P4)同源性较低,P1～P4间的kmt1基因、荚膜血清型A型的同源性较高(>99.0%)。说明本次分的4株病原菌P1～P4均为荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌。

• 单位
  青海省动物疫病预防控制中心; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室