弗氏枸橼酸杆菌TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应检测方法的建立

作者：金东; 王艺婷; 白雪梅; 叶长芸; 刘丽云

来源：疾病监测, 2013, (06): 451-455.

• 弗氏枸橼酸杆菌
• TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应
• tct基因 Citrobacter freundii
• real-time TaqMan PCR
• tct gene

目的建立针对弗氏枸橼酸杆菌的TaqMan实时荧光定量-聚合酶链反应(real time-PCR)检测方法。方法针对弗氏枸橼酸杆菌的特有序列设计引物和TaqMan探针,扩增目的基因建立标准曲线,确定检测方法的灵敏度;对20种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌进行检测,评价该检测方法的特异性;使用牛奶模拟标本评价方法在实际检测工作中应用性。结果 TaqMan real time-PCR检测方法对弗氏枸橼酸杆菌重组质粒的检测灵敏度为1.0×101拷贝/反应体系;该检测方法在检测30种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现特异性扩增。该检测方法对牛奶模拟样本中弗氏枸橼酸杆菌检测下限为1.0...

• 单位
  中国疾病预防控制中心; 传染病预防控制国家重点实验室