六种常见细菌16S rDNA基因的PCR-RFLP指纹图谱检测方法的建立

作者：龙玲; 吴达; 张银霞; 肖西志; 王军平; 李儒; 毛海岩

来源：中国兽医科学, 2014, 44(05): 521-526.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.05.008

• 16SrDNA
• PCR-RFLP
• 指纹图谱

为建立针对肺炎克雷伯氏菌、产色葡萄球菌、莫拉菌、睾丸酮丛毛单胞菌、炭疽芽胞杆菌和布氏杆菌的快速检测鉴定方法,提取上述6种菌的基因组DNA,然后以提取的DNA为模板,用16SrDNA的通用引物27f和1492r进行PCR扩增。用17种内切酶,即AvaⅠ、BgⅡ、BamHⅠ、DraⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅡ、HindⅢ、Hinf、HpaⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、TaqⅠ、XbaⅠ、XmaⅠ、AluⅠ、XhoⅠ和PvuⅠ,分别对6种菌的16S rDNA基因的扩增产物进行酶切。酶切产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果显示,每种菌形成了特异的16S rDNA RFLP指纹图谱。结果表明,建立的方法能够对6种细菌进行准确的鉴定,适用于口岸动物皮毛中6种细菌的快速鉴定。

• 单位
  西北民族大学; 中华人民共和国山东出入境检验检疫局; 甘肃出入境检验检疫局