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摘要
大豆紫色酸性磷酸酶基因GmPAP14受低磷诱导表达，其超表达显著提高植物有机磷利用效率，为进一步探究其调控机制，本研究以GmPAP14 cDNA序列检索大豆参考基因组，获取基因上游启动子序列，设计引物克隆了中黄15 GmPAP14启动子序列。利用PLACE与PlantCARE预测启动子调控元件发现，该序列中含有增强子调控元件、组织特异表达元件，根特异表达元件、转录因子PHR1结合的PIBS元件等。构建了GmPAP14启动子3个5’端缺失片段融合GUS的植物表达载体PGmPAP14-2568-GUS、PGmPAP14-2238-GUS、PGmPAP14-1635-GUS，并通过Floral dip法获得转基因拟南芥。利用GUS染色和活性测定分析GmPAP14启动子不同片段表达活性发现，正常磷条件下各片段转基因拟南芥均在根尖表达，低磷条件下GUS染色可扩展到成熟区和根毛，另外转PGmPAP14-2238-GUS植株的GUS活性最高。这些结果为后续的基因调控研究奠定重要基础。
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