M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响

作者：刘权; 关晓峰; 陶芝伟; 王翔; 吴基华; 刘云龙; 何子奇; 邓耀良

来源：广东医学, 2018, 39(03): 331-335.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20180209.001

• M2型巨噬细胞
• 草酸钙晶体
• 肾小管上皮细胞
• 损伤

目的探讨M2型巨噬细胞对草酸钙晶体(CaOx)刺激肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法将人单核细胞(THP-1)经佛波酯(PMA)及白细胞介素(IL)-4、IL-13序贯诱导为M2型巨噬细胞,使用实时定量PCR、Western Blot、ELISA法检测其表型标志物,以鉴定诱导分化情况。用浓度为0.5 mg/m L的CaOx刺激HK-2细胞,利用Transwell建立M2型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,实验分组为HK-2细胞组、HK-2细胞+M2型巨噬细胞共培养组、HK-2细胞+CaOx组、HK-2细胞+CaOx+M2型巨噬细胞共培养组。使用CCK-8法检测各组HK-2细胞活力、微量酶标仪法测各组HK-2细胞上清液的乳酸脱氢酶(LDH)活性、DAPI进行凋亡染色和Western Blot检测各组HK-2细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。划痕实验观测M2型巨噬细胞对HK-2细胞的迁移、修复的影响。结果表型标志物鉴定结果显示,成功将THP-1细胞序贯诱导为M2型巨噬细胞。CCK-8法结果显示M2型巨噬细胞显著增加CaOx对HK-2细胞损伤后的活力,且M2型巨噬细胞对HK-2细胞增殖具有促进作用(P<0.05)。LDH活性检测结果显示M2型巨噬细胞显著性降低CaOx刺激HK-2细胞的LDH活性(P<0.05)。DAPI染色及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达结果显示M2型巨噬细胞具有抑制CaOx刺激HK-2细胞凋亡的作用。划痕实验显示M2型巨噬细胞对HK-2细胞具有促进迁移、修复的作用。结论 M2型巨噬细胞对CaOx刺激HK-2细胞的损伤具有一定的抑制作用,且可促进HK-2细胞增殖、迁移。

• 单位
  广西医科大学第一附属医院