人脐带间充质干细胞来源的外泌体对肝脏再生的影响

作者：陈良; 冯啸; 袁泽南; 彭延文; 张琪; 杨扬; 张英才

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(10): 1684-1687.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.10.019

• 间充质干细胞
• 外泌体
• 肝脏再生
• 肝切除

目的观察人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hucMSC-Ex)对小鼠大部分肝切除后肝脏再生和肝细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法建立小鼠大部分肝切除模型,比较hucMSC-Ex处理组(n=15)和对照组(n=15)术后24、48、72 h剩余肝重体重比、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),获取肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色及细胞核增殖抗原(Ki-67)免疫组织化学染色观察肝脏再生。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测hucMSC-Ex在体外对人L02肝细胞增殖的作用。结果采用超速离心方法从hucMSCs条件培养基中成功分离出外泌体,Nasosight颗粒跟踪分析仪和透射电镜分析其直径范围在50150 nm,最大分布峰值为137 nm;Western blot检测到hucMSC-Ex中CD63、CD9及HSP90α等标志蛋白的阳性表达。术后48、72 h后hucMSC-Ex处理组剩余肝重体重比较对照组增高[(3.06±0.44)%比(2.67±0.23)%、(3.18±0.29)%比(2.75±0.24)%,P=0.047、0.013],术后24、48 h处理组比对照组的ALT[(165.0±29.7)比(1 596.0±711.9)U/L、(49.5±18.7)比(124.0±39.7)U/L]、AST[(285.0±31.1)比(3 030.0±1249.0)U/L、(126.3±29.6)比(198.3±37.3)U/L]下降,差异均有统计学意义(P=0.014、0.014、0.011、0.030);术后24 h处理组的LDH较对照组下降[(457.0±41.0)比(4 605.0±2 941.0)U/L,P=0·033]。与对照组比较,处理组肝组织HE染色脂肪变性、肝细胞肿胀以及坏死较少,Ki-67免疫组织化学染色阳性表达的细胞增加。体外实验CCK-8检测100μg/ml处理组的吸光度值比对照组显著增加(1.198±0.087比0.970±0.032,P=0.006)。结论 hucMSC-Ex可以加快肝切除术后肝脏再生及肝功能的恢复,促进肝细胞增殖。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 中山大学