菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库及AcSERK1启动子相关诱饵载体的构建

作者：栾爱萍; 何业华^*; 谢桃

来源：分子植物育种, 2021, 19(05): 1541-1545.

DOI：10.13271/j.mpb.019.001541

• 菠萝(Ananas comosus)
• AcSERK1
• 体细胞胚
• 酵母单杂交

为筛选与菠萝AcSERK1启动子中胚性细胞特异性表达调控区段(-983～-881 nt)的结合蛋白,本研究利用MatchmakerTM Gold Yeast One-Hybrid System构建菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库以及胚性细胞特异性表达调控区段(SE103)的诱饵载体。建立的菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库库容量为1.25×107CFU,其插入片段平均长度约1.5 kb,重组率为100%。通过检测,AbA最低浓度为600 ng/mL时,构建的诱饵载体pAbAi-SE103在Y1HGold酵母菌株中的自激活活性被有效抑制,表明该菠萝体细胞胚酵母单杂交cDNA文库以及诱饵酵母菌株Y1HGold (pAbAi-SE103),可用于AcSRKE1启动子中胚性细胞特异性表达调控区段互作蛋白的筛选实验,为胚性细胞特异性转录因子的分离鉴定提供数据参考。

• 单位
  华南农业大学; 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所