成纤维细胞生长因子受体3与人乳头瘤病毒2型E2对角质形成细胞分化的初步研究

作者：郭清清; 齐家跃; 解方^*; 李承新^*

来源：中华皮肤科杂志, 2023, 56(11).

• 角蛋白细胞
• 受体, 成纤维细胞生长因子, 3型
• 人乳头瘤病毒2
• 抗原, 分化
• 人乳头瘤病毒2型E2蛋白
• 角质形成细胞分化
• 细胞空间定位

目的研究成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)与人乳头瘤病毒2型(HPV2)E2对人角质形成细胞系HaCaT和正常人表皮角质形成细胞系NHEK分化的调控效应。方法在HaCaT和NHEK细胞中, 采用慢病毒转染法构建HPV2 E2稳转细胞系(HPV2 E2转染组), 采用质粒转染法构建过表达FGFR3或FGFR3突变体K650E的细胞, 即FGFR3-WT转染组、FGFR3-K650E转染组, 均以转染空载体的细胞为空载体对照组。采用实时荧光定量PCR检测HPV2 E2 mRNA表达, Western印迹法检测HPV2 E2、FGFR3及角质形成细胞分化标志性分子兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白的表达。激光共聚焦显微镜观察HPV2 E2与FGFR3的细胞空间定位。两组数据比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用Dunnett-t检验。结果成功构建HPV2 E2稳转细胞系, HaCaT和NHEK细胞中HPV2 E2转染组HPV2 E2 FLAG蛋白表达量均显著高于空载体对照组(t值分别为13.71和25.91, 均P < 0.001);在HaCaT和NHEK细胞中成功过表达FGFR3-WT和FGFR3-K650E, 两细胞系FGFR3-WT转染组和FGFR3-K650E转染组FGFR3蛋白表达均显著高于空载体对照组(F值分别为473.90和579.90, 均P < 0.001)。HaCaT及NHEK细胞中, HPV2 E2转染组细胞分化相关标志物兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白表达水平均较空载体对照组上调(均P < 0.05), FGFR3-WT转染组和FGFR3-K650E转染组兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白表达水平亦较空载体对照组上调(均P < 0.05)。在HPV2 E2稳转的HaCaT及NHEK细胞中, HPV2 E2 + FGFR3-WT转染组、HPV2 E2 + FGFR3-K650E转染组兜甲蛋白、聚丝蛋白、内披蛋白表达水平较HPV2 E2 +空载体组下调(均P < 0.05)。激光共聚焦显微镜显示, HPV2 E2与FGFR3在HaCaT细胞核膜及细胞质中存在空间共定位。结论 HPV2 E2与FGFR3均可以诱导HaCaT细胞和NHEK细胞分化, FGFR3可以抑制HPV2 E2诱导的HaCaT细胞及NHEK细胞的分化趋势, 这可能与HPV2 E2与FGFR3存在细胞空间共定位有关。

• 单位
  南开大学; 解放军总医院