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摘要
明确CtbZIP47在酵母油脂合成中的作用，为深入探究转录因子调控油脂合成代谢奠定基础。通过采用在线软件对红花CtbZIP47蛋白进行生物信息学分析；采用PCR方法扩增CtbZIP47基因cDNA序列；qRT-PCR方法检测该基因的表达情况；选择同源重组的方法构建pCAMBIA1302-CtbZIP47植物表达载体，利用激光共聚焦显微镜观察其在细胞中的定位情况；同时构建 pPICZαA-CtbZIP47酵母表达载体，测定酵母中的油脂含量。CtbZIP47蛋白由129个氨基酸编码组成；根据qRT-PCR结果显示CtbZIP47基因在种子成熟后期表达量逐渐升高；通过生物信息学分析该蛋白为亲水性蛋白，具有核定位信号；亚细胞定位结果显示其定位在细胞核中；最后，成功构建重组酵母表达载体pPICZαA-CtbZIP47，并测定了转基因酵母菌株的油脂含量，其含量显著高于毕赤酵母菌株和转空载体的毕赤酵母菌株。CtbZIP47基因在酵母油脂合成过程中起作用，同时也为CtbZIP家族基因的深入研究奠定基础。
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单位生命科学学院; 吉林农业大学
