南蛇藤提取物调控Lgr5/Wnt/β-catenin信号通路逆转胃癌前病变的机制

作者：张效泽; 朱方圆; 文俊凇; 刘延庆; 朱耀东^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-9.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20240223

• 南蛇藤提取物
• 胃癌前病变
• 胃类器官损伤模型
• Lgr5/Wnt/β-catenin通路

目的：基于胃类器官损伤模型探究南蛇藤提取物 (COE)调控富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5 (Lgr5)/配体分泌介质(Wnt)/胞内β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路影响胃类器官增殖分化及Lgr5表达从而逆转胃癌前病变(PLGC)的作用机制。方法：通过小鼠胃腺体干细胞建立胃类器官，使用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG， 0.02 mg·L-1)处理胃类器官构建胃类器官损伤模型；将胃类器官损伤模型随机分为正常组、模型组(0.02 mg·L-1 MNNG)、COE低、中、高(5， 10， 20 mg·L-1)剂量组、Wnt抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)(0.5 mg·L-1)组并分别用不同药物处理24 h；镜下观察不同药物浓度胃类器官的数量与体积；采用噻唑蓝(MTT)法检测胃类器官损伤模型活力；采用苏木素-伊红 (HE)染色法观察胃类器官形态与病理学；采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同药物浓度胃类器官中Lgr5、黏蛋白2 (MUC2 )、黏蛋白5AC (MUC5AC )、黏蛋白6 (MUC6 )、Wnt和β-catenin表达情况。结果：与正常组比较，模型组胃类器官数量减少，体积减小，活力明显降低，Lgr5、MUC2、Wnt与β-catenin的表达的表达显著升高，MUC5AC、MUC6的表达显著降低(P＜0.05，P＜0.01)，实验结果具有统计学意义。与模型组比较，COE低、中、高组的胃类器官数量及体积均有所恢复；胃类器官活力明显增强，且在COE浓度为20 mg·L-1时效果最显著(P<0.05)；Lgr5、MUC2的表达显著降低，MUC5AC、MUC6的表达显著升高(P＜0.05，P＜0.01)。Wnt抑制剂能够促进胃类器官MUC5AC、MUC6的表达，降低Lgr5、MUC2、Wnt与β-catenin的表达，而高剂量COE与Wnt抑制剂共同使用能够促进这一趋势(P＜0.05，P＜0.01)。结论：COE通过抑制Lgr5、MUC2、Wnt、β-catenin的表达和促进MUC5AC及MUC6的表达，抑制Wnt/β-catenin通路，促进胃类器官增殖分化，逆转PLGC过程。

• 单位
  扬州大学; 安徽医科大学第一附属医院