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摘要
为了能从粪便中对捻转血矛线虫卵进行特异性检测，基于捻转血矛线虫ITS2-28S基因序列设计特异性引物，通过对退火温度反应条件优化，建立捻转血矛线虫特异性PCR检测方法。结果显示，该方法成功从捻转血矛线虫卵中扩增出约270 bp的特异性片段，其最低检出质量浓度为0.298 pg/μL,敏感性较高；进一步对捻转血矛线虫、细颈线虫、粗纹食道口线虫等多种线虫的虫卵DNA样品进行扩增，该方法仅能特异性扩增出捻转血矛线虫卵的目的片段，证明特异性良好。利用所建立的PCR检测方法对120只山羊的粪便样品进行检测，显示受检样品中捻转血矛线虫阳性率为38.3%,高于显微镜检测结果(阳性率为24.2%)。结果表明，该研究建立的PCR方法能够应用于临床检测山羊粪便样品中的捻转血矛线虫卵，可为山羊捻转血矛线虫病的诊断与防治提供有效技术支持。
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