Anti-LMP1scFv/tP融合蛋白基因递送载体在大肠杆菌中的表达与纯化

作者：黄秀兰; 唐旭东; 林观平; 李祥勇; 崔国辉; 周克元

来源：中国细胞生物学学报, 2010, (03): 386+377-385.

• 潜伏膜蛋白1
• 单链抗体
• 鱼精蛋白截短体
• 融合蛋白
• 基因递送 latent membrane protein 1
• single-chain antibody fragment
• truncated protamine
• fusion protein
• gene delivery

潜伏膜蛋白1(LMP1)是一种EB病毒编码的膜蛋白,组成型表达于各种肿瘤细胞表面。通过体外基因拼装技术,构建抗LMP1单链抗体/鱼精蛋白截短体融合蛋白基因(anti-LMP1scFv/tP)。在抗LMP1单链抗体基因的3'末端连接上编码鱼精蛋白截短体的基因序列,设计anti-LMP1scFv/tP融合蛋白基因。采用PCR为基础的基因拼接获得anti-LMP1scFv/tP。在大肠杆菌Rosseta中诱导表达anti-LMP1scFv/tP融合蛋白并利用其His标签在变性条件下通过Ni~(2 )亲合层析介质进行纯化,纯化产物通过尿素浓度梯度透析的方法进行复性。间接免疫荧光染色检测anti-LMP...

• 单位
  广东医科大学; 广东医学院附属医院