Necrostatin-1对TNF-α诱导的胰岛细胞损伤的保护作用

作者：叶斌; 容鹏飞; 刘亮; 王维; 张声旺^*

来源：中南大学学报(医学版), 2020, 45(07): 752-758.

DOI：10.11817/j.issn.1672-7347.2020.190534

• 糖尿病
• 胰岛
• necrostatin-1
• TNF-α

目的:研究necrostatin-1(Nec-1)是否对TNF-α介导的胰岛细胞损伤具有保护作用。方法:新生猪胰岛细胞分离纯化后分为3组:Nec-1组(在培养基中加入Nec-1+TNF-α)、TNF-α组(在培养基中加入TNF-α),以及纯培养基的对照组,每组均含胰岛10 000 IEQ,培养48 h后观察细胞数量的变化;通过吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)染色观察细胞的死亡状况;采用化学发光法检测胰岛素分泌量和核酸定量分析法检测胰岛细胞DNA含量;采用RT-PCR法检测胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的mRNA表达水平;采用流式细胞术检测B细胞的活性。结果:Nec-1组、TNF-α组与对照组培养48 h后胰岛数量分别为(8 425±2 187),(4 325±778)与(7 122±1 558) IEQ;AO/EB染色显示TNF-α组死亡的胰岛细胞较另外两组明显增多;Nec-1组、TNF-α组与对照组胰岛素/胰岛细胞DNA值分别为(13.21±3.15),(2.47±0.45)与(7.44±0.97) mIU/mg;与TNF-α组、对照组比较,Nec-1组胰岛素(6.73±1.07)、胰高血糖素(10.13±1.98)与生长抑素(8.57±1.11)基因的mRNA相对表达水平最高均(均P<0.05);Nec-1组活细胞比例(97.32±1.87)%、B细胞比例(90.86±3.68)%均较TNF-α组、对照组明显升高(均P<0.05)。结论:TNF-α可以诱导新生猪胰岛细胞的损伤,而Nec-1对TNF-α诱导的胰岛细胞损伤具有保护作用,Nec-1可能会提高新生猪胰岛细胞团中内分泌细胞的含量。

• 单位
  中南大学湘雅三医院; 益阳市中心医院