摘要
目的:探讨circ_AFF2通过调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸/蛋白激酶B(AKT)通路对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜成纤维细胞的增殖、迁移、侵袭的作用机制。方法:采用qRT-PCR检测健康对照滑膜组织和RA滑膜组织中circ_AFF2相对表达量。通过体外培养RA滑膜成纤维MH7A细胞,将细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circ_AFF2组(转染si-circ_AFF2)和si-circ_AFF2+IGF-1组(转染si-circ_AFF2后,采用50 ng/mL的PI3K/AKT通路激活剂IGF-1处理)。然后通过qRT-PCR检测各组细胞circ_AFF2相对表达量;MTT检测各组细胞活力;Western blotting检测各组细胞Ki-67、PCNA、MMP-2、E-cadherin、N-cadherin和PI3K/AKT通路相关蛋白的表达;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果:与健康对照滑膜组织相比,circ_AFF2相对表达量在RA滑膜组织中明显增加(P<0.05)。与si-NC组相比,si-circ_AFF2组的circ_AFF2相对表达量、细胞活力、Ki-67以及PCNA蛋白表达均明显降低(P<0.01)。与si-NC组相比,si-circ_AFF2组的迁移细胞数目、侵袭细胞数目、MMP-2以及N-cadherin蛋白表达均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达明显增加(P<0.01)。3组p-PI3K、p-AKT蛋白表达均明显降低(P<0.01),si-circ_AFF2组和si-circ_AFF2+IGF-1组p-PI3K、p-AKT蛋白表达均低于si-NC组(P<0.05),而3组PI3K、AKT蛋白表达无变化(P>0.05)。与si-circ_AFF2组相比,si-circ_AFF2+IGF-1组的circ_AFF2相对表达量、细胞活力、迁移细胞数目、侵袭细胞数目、Ki-67、PCNA、MMP-2及N-cadherin蛋白表达明显增加(P<0.01),E-cadherin蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:circ_AFF2可以通过激活PI3K/AKT通路促进RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭。
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单位湖北文理学院; 襄阳市中心医院