摘要
目的探究飞燕草素(Delphinidin)对光诱导661W细胞铁过载的调控作用及机制。方法将小鼠视网膜感光细胞661W分为Control组、Light组、Light+铁螯合剂(DFP)组、Light+Delphinidin组、Control+Delphinidin组。以(2000±200)lx白色荧光持续照射661W细胞48 h建立光损伤模型,采用CCK-8法筛选Delphinidin和DFP的最佳作用浓度。利用CCK-8法测定各组细胞活力,Hoechst-PI荧光观察各组细胞的细胞膜受损程度,流式细胞仪检测各组细胞铁含量及脂质过氧化物水平,Western blot检测各组细胞铁代谢相关蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测结果显示,5μmol·L-1 Delphinidin和20μmol·L-1 DFP为最佳作用浓度。与Control组相比,Light组661W细胞损伤严重,细胞活力下降为(56.69±1.48)%,铁含量增加,脂质过氧化物水平升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Light组相比,Light+DFP组和Light+Delphinidin组661W细胞损伤减轻,细胞活力分别升高为(62.85±0.46)%和(63.41±0.68)%,铁含量减少,脂质过氧化物水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与Control组相比,Light组细胞二价金属离子转运体1(DMT1)、转铁蛋白受体1(TfR1)、铁蛋白轻链(FTL)、铁蛋白重链1(FTH1)表达水平均升高,膜铁转运蛋白(Fpn)表达水平降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与Light组相比,Light+DFP组和Light+Delphinidin组细胞TfR1、Fpn蛋白表达水平均升高,DMT1、FTL和FTH1蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Delphinidin可通过调节铁代谢相关蛋白表达,缓解光诱导的661W细胞铁过载,进而抑制脂质过氧化反应,减少视网膜氧化损伤。
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单位成都医学院; 乐山市人民医院