口蹄疫病毒vp3-间接免疫荧光诊断方法的建立

作者：王冰; 周国辉; 涂亚斌; 朴范泽; 于力

来源：黑龙江八一农垦大学学报, 2008, (02): 55-58.

• 口蹄疫病毒
• VP3
• 鉴别诊断
• 间接免疫荧光 foot-and-mouth disease virus
• differential diagnosis
• indirect fluorescent antibody

口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP3为保守区,各血清型间差异不大,因此以其为抗原建立一种快速、有效、操作简便的FMDV自然感染动物与疫苗免疫动物鉴别诊断方法。PCR扩增口蹄疫病毒结构蛋白VP3基因,克隆到杆状病毒表达系统转移载体pFastBacHT-A中,转座DH10感受态细胞,获得阳性克隆。提取基因组Bacmid,转染Sf9昆虫细胞,获得含口蹄疫病毒结构蛋白基因VP3基因的重组杆状病毒。以被检测血清为一抗,以FITC标记的兔抗牛IGg为二抗,通过反应条件的优化,建立间接免疫荧光检测方法,并检测血清44份,与ELISA方法符合率为90.9%。

• 单位
  动物科技学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 黑龙江八一农垦大学; 兽医生物技术国家重点实验室