结缔组织生长因子与转化生长因子及Smad信号通路在兔角膜创伤愈合中的作用

作者：杨咏梅; 吴欣怡; 杜立群

来源：中华眼科杂志, 2006, (10): 918-924.

• 角膜
• 伤口愈合
• 即早蛋白质类
• 胞间信号肽类和蛋白质类
• 转化生长因子 B
• 信号传递

目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)与转化生长因子β_1(TGF-β_1)在兔角膜创伤愈合过程中的表达和对创伤愈合的作用,并对二者之间的相互作用及与此有关的 Smad 信号传导通路作初步研究。方法选择 Albino 纯种白兔26只,随机分为4组:(1)空白对照组:2只兔(4只眼),未做任何处理。(2)单纯角膜创伤组:又分术后2、6h,1、3、7、21 d 亚组,每个亚组2只兔(4只眼)。(3)TGF 抗体组:颞侧球结膜下注射15.5μg TGF 抗体,又分为3、7、21d 亚组,每个亚组2只兔(4只眼)。(4)Smad4抗体组:颞侧球结膜下注射20μg Smad4抗体,又分为3、7、21d 亚组,每个亚组2只兔(4只眼)。实验眼首先行直径3mm、包含约0.05mm 实质层的板层角膜切除术,然后 TGF 抗体组术眼球结膜下注射 TGF-β_1抗体,Smad4抗体组术眼球结膜下注射 Smad4抗体,用免疫组织化学和mRNA 原位杂交方法分别检测 CTGF、TGF-β_1、纤维粘连蛋白(FN)在术后2、6h、1、3、7、21d 的表达和Ⅰ型胶原、CTGF mRNA 在术后6h、3、7、21d 的表达及角膜纤维细胞活化增生情况。结果 (1)正常兔眼角膜未发现 CTGF 蛋白和 mRNA 的表达。TGF-β_1蛋白在正常角膜上皮中有表达。(2)术后6h角膜纤维细胞开始活化,创伤后 TGF-β_1在上皮和实质中的表达显著增加,同时 CTGF mRNA 表达上调;术后3d TGF-β_1蛋白、CTGF 及Ⅰ型胶原 mRNA 的表达到高峰;术后7d,3者在上皮中表达明显,TGF-β_1蛋白在实质中表达减少;术后21d,绝大多数纤维细胞恢复到伤前状态,CTGF 蛋白和 mRNA在上皮中偶见表达。(3)TGF 抗体使实质中的 TGF-β_1、CTGF、FN 表达减少,同时下调上皮中 CTGFmRNA 的表达。(4)Smad4抗体抑制实质层 TGF 的表达,而对 CTGF 表达无影响。结论创伤能引起TGF-β_1蛋白、CTGF 蛋白及 mRNA 的表达增加,Ⅰ型胶原和 FN 蛋白合成增加。TGF-β_1促进角膜纤维细胞活化,上调 CTGF 的表达;CTGF 主要调节Ⅰ型胶原和 FN 生成,从而影响角膜伤口愈合和瘢痕形成;这两种调节作用可能不通过 Smad 通路传导。(中华眼科杂志,2006,42:918-924)

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 济南市中心医院; 山东大学