非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体的制备与应用

作者：郝丽影; 王彦伟; 孙玉洁; 曹红梅; 黄甜; 逄文强; 李向东; 邓均华^*; 田克恭^*

来源：河南农业科学, 2020, 49(10): 124-129.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.10.017

• 非洲猪瘟病毒
• P30蛋白
• 大肠杆菌表达系统
• 单克隆抗体
• 胶体金免疫层析法

为研发非洲猪瘟病毒(ASFV)的免疫学诊断试剂,利用大肠杆菌表达系统表达重组ASFV P30蛋白,制备并鉴定P30蛋白单克隆抗体,建立检测ASFV的胶体金免疫层析法(GICA)。结果显示,成功构建了重组表达质粒pET28a-P30,实现了重组P30蛋白的可溶性表达,且该重组蛋白与ASFV阳性血清可发生特异性反应;制备了10株稳定分泌P30蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,腹水ELISA效价均高于1∶40 000,与ASFV具有良好的反应性,且不与其他常见猪源病毒反应;利用2株单克隆抗体建立胶体金免疫层析法,可用于ASFV的检测。