摘要
为了揭示失血与LPS刺激后红螯光壳螯虾血细胞的生成及其成熟过程,利用EdU标记检测失血后红螯光壳螯虾造血组织细胞增殖的变化,并追踪标记新生血细胞产生的释放情况.利用流式细胞技术将红螯光壳螯虾的4种类型血细胞(透明细胞、小颗粒细胞、中颗粒细胞和大颗粒细胞)按大小进一步分为Ⅰ~Ⅳ类,检测分析失血和LPS刺激后螯虾不同类型血细胞的比例变化.结果显示:红螯光壳螯虾造血组织细胞在失血刺激6~24 h时,无论失血与否,造血组织都处于活跃的增殖状态,增殖水平无明显差异.失血后,血淋巴中出现的EdU标记的新生血细胞较其他血细胞小且圆,推测其为前血细胞.透明细胞和小颗粒细胞主要分布在300~400μm2之间,中颗粒细胞和大颗粒细胞主要分布在400~500μm2之间,随着血细胞颗粒性的增加,细胞逐渐增大.失血刺激12 h时,透明细胞和小颗粒细胞显著增加,而中颗粒和大颗粒细胞显著减少.透明细胞和小颗粒细胞的增加主要由各自的Ⅰ类细胞比例显著增加造成,说明失血后红螯光壳螯虾启动造血最先产生释放的为此类较小的前血细胞. LPS刺激36 h时,红螯光壳螯虾小颗粒细胞比例显著升高,大颗粒细胞比例显著降低.进一步分析发现,LPS刺激12 h时,透明细胞和小颗粒细胞中的Ⅱ类细胞比例明显降低,至24 h时Ⅰ类和Ⅱ类细胞的比例开始显著升高.由此认为,失血刺激与LPS刺激可能通过不同方式作用于螯虾血细胞的释放及成熟.
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单位天津师范大学; 生命科学学院