病毒载体介导的基因沉默体系对朱顶红褪绿环斑病毒NSm基因的沉默效应

作者：许云玉; 李浩; 陈敏; 贾志强; 高雪; 陈增敏; 赵于丁; 刘雅婷^*; 李永忠^*

来源：植物保护学报, 2023, 50(04): 923-931.

DOI：10.13802/j.cnki.zwbhxb.2023.2022013

• 朱顶红褪绿环斑病毒
• 基因沉默
• 运动蛋白
• 病毒积累量
• 侵染效率

为探讨烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus,TRV）载体介导的基因沉默技术对朱顶红褪绿环斑病毒（Hippeastrum chlorotic ringspot virus,HCRV）运动蛋白基因NSm的沉默效应，以本氏烟Nicotiana tabacum为材料，构建靶向HCRV NSm序列的基因沉默表达载体pTRV2-NSm，经农杆菌Agrobacterium介导侵染烟苗，检测其侵染效率，人工接种HCRV到沉默表达载体处理过的烟苗，通过观察发病症状、统计病情并应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测TRV介导的基因沉默体系对HCRV侵染的沉默效应。结果表明，pTRV2-NSm沉默表达载体对本氏烟植株的侵染率达到95.00%，并且对本氏烟的生长无明显影响；与对照相比，经沉默载体处理的烟草植株接种HCRV后发病率显著降低，在接种后14 d发病率下降了90个百分点，病毒积累量明显下降，随着时间延长pTRV2-NSm对病毒的抑制效果持续升高，在接种后14 d对病毒病的防治效果最高，达93.13%;qRT-PCR检测发现基因沉默表达载体在21 d内能持续有效表达。表明本研究构建的基因沉默体系能有效沉默HCRV NSm的表达，同时降低HCRV在烟草上的发病率和积累量。

• 单位
  云南省烟草公司普洱市公司; 昭通市植保植检站; 云南农业大学