摘要

目的 探讨转移性宫颈癌组织的旁分泌作用对肿瘤细胞扩散的影响。方法 选择22例转移性宫颈鳞癌患者的手术标本(癌组织和癌旁组织)和血清标本,以及22名健康体检者的血清标本,采用逆转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-21-5p在癌组织和癌旁组织中的表达水平;分别转染miR-21-5p模拟物/抑制剂到宫颈癌SiHa细胞,采用RT-qPCR、细胞集落形成实验、Transwell迁移实验、噻唑蓝(MTT)比色法、蛋白免疫印迹法、双荧光素酶报告分析差异;采用高速离心法提取血清外泌体;采用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术、蛋白免疫印迹法、透射电子显微镜(TEM)对外泌体进行表征鉴定;采用RT-qPCR检测宫颈鳞癌患者和健康体检者血清外泌体中miR-21-5p的表达差异;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清外泌体中miR-21-5p对肿瘤转移的诊断效能。结果miR-21-5p在转移性宫颈鳞癌组织中表达上调;miR-21-5p过表达能促进宫颈鳞癌SiHa细胞集落形成以及细胞增殖与迁移(P均<0.01);双荧光素酶报告显示,miR-21-5p可以靶向快速发育生长因子同源蛋白2抗体(SPRY2),对SPYR2的表达水平进行调控;miR-21-5p模拟物转染的SiHa细胞中,磷酸化丝裂原和应激激活的蛋白激酶、磷酸化核糖体S6蛋白激酶、磷酸化原癌基因C-RAF、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激酶和磷酸化MAPK蛋白的表达均上调(P均<0.05)。miR-21-5p在宫颈鳞癌患者的血清外泌体中上调(P <0.05)。血清外泌体评估宫颈癌转移的ROC曲线下面积为0.9375。结论 转移性宫颈鳞癌患者组织中miR-21-5p通过外泌体传递促进肿瘤转移,其机制可能与靶向SPRY2/细胞外调节蛋白激酶/MAPK信号通路有关。