摘要
目的:探索分离提取子宫内膜异位症患者腹腔冲洗液中的辅助性T细胞17(Th17)的方法并研究其功能调控机制。方法:收集子宫内膜异位症患者腹腔冲洗液,采用流式细胞术根据细胞表面趋化因子受体的表达水平识别和分选Th17细胞。q RT-PCR和Immunoblotting检测活化的激酶C受体1(RACK1)在Th17细胞内的表达。体外诱导CD4+T细胞分化为Th17细胞,同时用慢病毒转导Th17细胞沉默RACK1的表达,流式细胞术和q RT-PCR检测Th17细胞表达的促炎性细胞因子、信号转导和转录激活蛋白3(STAT3)。结果:腹腔冲洗液中的CD3+CD4+CXCR3-CCR10-CCR4+CCR6+T细胞为Th17细胞。与轻型患者相比,中重型患者腹腔中Th17细胞表达较高的IL-17A、IL-22、IL-17F和RACK1。体外诱导分化的Th17细胞上调RACK1的表达,RACK1基因沉默后Th17细胞表达的IL-17A、IL-22和IL-17F降低,同时伴有STAT3的表达下调。结论:RACK1可能通过促进STAT3的表达来增强子宫内膜异位症腹腔Th17细胞的促炎性功能。
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单位中心实验室; 武汉大学人民医院