裂解型腺病毒Ad-E1A的构建以及体外对肝癌细胞的作用

作者：周忆新; 谢宇锋; 叶震敏; 盛伟华; 杨吉成

来源：江苏医药, 2010, (03): 305-308.

DOI：10.19460/j.cnki.0253-3685.2010.03.022

• 裂解型腺病毒
• 细胞凋亡
• E1A
• SMMC-7721
• 肝癌细胞 Oncolytic adenovirus
• Apoptosis
• E1A
• SMMC-7721
• Hepatoma carcinoma cell

目的构建Ad-E1A裂解型腺病毒载体,研究其对肝癌细胞的裂解作用。方法以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,用特异性引物PCR法扩增E1A基因,酶切后连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,用PmeI酶对pAdTrack-CMV-E1A线性化后,与pAdEasy-1共转化在BJ5183大肠杆菌中进行同源重组,筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-E1A;再用PacI酶切对重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-E1A腺病毒子。在QBI-293A细胞中多轮感染后获得高效价的病毒。将Ad-E1A腺病毒感染SMMC-7721,并用MTT和流式细...

• 单位
  苏州大学