天山雪莲RAPD反应条件的优化及再生体系DNA多态性分析

作者：欧元; 袁晓凡; 赵兵; 王晓东; 陈书安; 王玉春

来源：中国现代中药, 2009, (02): 16-19.

DOI：10.13313/j.issn.1673-4890.2009.02.001

• 天山雪莲
• 再生体系
• RAPD Saussurea involucrata Kar.et Kir.
• Regeneration system
• RAPD

目的:用RAPD法研究天山雪莲再生过程中DNA的变异。方法:优化RAPD反应体系中各影响因素,分别以天山雪莲种子苗、愈伤组织、丛生芽及再生植株的总DNA为模板,进行多态性分析。结果:优化反应体系为:Mg2+2.50mmol·L-1、Taq DNA聚合酶1.00U、引物0.30μmol·L-1、模板DNA 20ng、dNTP0.20mmol·L-1,退火温度为37℃。20条随机引物共扩增出174条带,平均每条引物扩增8.7条带,其中多态性条带18条,多态性位点比率为10.3%。天山雪莲再生体系与种子苗之间相似性系数为0.75～0.80。结论:天山雪莲再生过程中在DNA水平上发生了一定程度的变异。

• 单位
  中国科学院过程工程研究所; 中国生物技术发展中心; 公安部物证鉴定中心; 生化工程国家重点实验室