猪α干扰素在家蚕中表达及其抗病毒活性测定

作者：钟鲁龙; 易咏竹; 丁农; 张金卫; 柳纪省

来源：生物技术进展, 2013, (04): 252-256+228.

• 猪干扰素
• 抗病毒活性
• 家蚕
• 杆状病毒
• 真核表达 porcine interferon
• antiviral activity
• silkworm
• baculovirus
• eukaryotic expression

本研究利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕中表达猪α干扰素。首先优化并合成猪α干扰素基因,将其克隆到杆状病毒转移载体pVL1393的多角体基因启动子下游,与线性化的Bm-BacPAK6DNA共转染至Bm-N细胞,在细胞内进行同源重组后,纯化得到重组病毒。Western杂交结果显示,在蚕血淋巴中可检测到猪α干扰素表达。用微量细胞病变抑制法在Vero/VSV GFP系统上进行干扰素活性测定,结果表明重组猪α干扰素有抗病毒活性,效价达到106U/mL以上,证明在家蚕幼虫体内成功表达了有活性的猪α干扰素。

• 单位
  农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院蚕业研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室