摘要
目的观察甲状腺癌细胞中微小RNA-330(miR-330)对T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM-3)的调控作用, 及其对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响。方法收集河北医科大学第二医院甲状腺乳腺外科2020年1月到2021年6月30例甲状腺癌及其癌旁组织标本。应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测甲状腺癌组织中miR-330及TIM-3基因的表达量;将miR-330模拟物及阴性对照质粒转染至TPC-1细胞中, 应用双荧光素酶报告基因实验分析TIM-3是否为miR-330的靶基因;应用荧光定量PCR方法检测miR-330的表达对TIM-3基因的影响;随后, 将TIM-3过表达质粒与miR-330模拟物转染至TPC-1细胞中, 应用Transwell细胞侵袭实验分析miR-330和TIM-3表达水平对甲状腺癌细胞侵袭能力的影响, 两组间比较应用t检验。结果荧光定量PCR实验结果表明, miR-330在甲状腺癌组织中的表达水平(0.38±0.07)明显低于癌旁组织(1.01±0.06, t=10.860, P<0.05);TIM-3的表达水平(5.70±0.81)明显高于癌旁组织(1.01±0.04, t=9.923, P<0.05), 相关性分析表明, miR-330与TIM-3两者表达呈负相关(r=-0.492, P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果表明, miR-330模拟物组荧光素酶活性(0.37±0.06)明显低于对照组(1.02±0.07, t=12.460, P<0.05);荧光定量PCR结果表明, 转染miR-330模拟物组TIM-3的表达水平(0.43±0.06)明显低于对照组(1.02±0.02, t=10.080, P<0.05);miR-330模拟物组侵袭细胞数(122.30±18.77)明显低于对照组(285.00±16.00, t=11.420, P<0.05);而与TIM-3过表达质粒共转染细胞后, miR-330模拟物转染组(228.00±12.53), 与对照组(225.00±13.45)比较差异无统计学意义(t=0.286, P>0.05)。结论 miR-330可通过靶向作用于TIM-3基因抑制甲状腺癌细胞侵袭。
-
单位基础医学院; 河北医科大学; 河北医科大学第二医院