重组牛凝乳酶的纯化及其酶学性质的研究

作者：李玉秋; 王景会; 李铁柱; 张莉; 杨贞耐

来源：食品与发酵工业, 2010, (08): 50-54.

• 重组牛凝乳酶
• 纯化
• 酶学性质

用硫酸铵分级沉淀分离提取重组牛凝乳酶(GS115/pPICZαA-chymosin),并经过Sephadex G-75分子筛和DEAE-52离子交换2次层析柱纯化,酶的比活由672 U/mg提高到3 865 U/mg。对纯化后重组牛凝乳酶酶学性质研究表明该酶的最适反应温度为55℃,30～45℃酶活较稳定,保温120 min,剩余活力达73.5%;最适反应pH值为5.0,并在pH 3.0～7.0范围内酶活保持稳定。Ca2+离子浓度0.02%时凝乳酶活力最高,NaCl浓度小于10%时可促进酶反应,除Ni2+和Cu2+对酶有抑制作用外,Fe2+,Fe3+,Mn2+,Mg2+对酶有促进作用。