益气养阴解毒方联合5-FU对HepG_2细胞Survivin和Caspase-3的影响

作者：陈凯; 朱虹

来源：四川中医, 2009, 27(02): 21-25.

• 中药
• 含药血清
• HepG2细胞
• 5-FU
• Survivin
• Caspase-3

目的:观察益气养阴解毒方的含药血清与化疗药5-FU体外共同作用于肝癌HepG2细胞后,对细胞Survivin的表达和Caspase-3活性的影响,从而探讨本益气养阴解毒方增强5-FU诱导HepG2细胞凋亡的相关机制。方法:运用血清药理学方法制备大鼠的益气养阴解毒方的含药血清,分为中药含药血清组、化疗药物5-FU组和中药含药血清+5-FU组,并设不含药的空白大鼠血清为对照组,分别作用于HepG2细胞,应用SP免疫细胞化学染色法及western-blot检测各组细胞24h、48h、72h后Survivin蛋白的表达变化;应用DEVD-pNA降解法检测各组细胞24h、48h、72h后Cas-pase-3活性变化。结果:(1)各组作用24h、48h、72h后,中药含药血清组HepG2细胞Survivin蛋白的表达量无明显变化(与对照组相比,P>0.05);5-FU组HepG2细胞Survivin蛋白的表达量逐渐升高(与对照组相比,P<0.05),且具有时间依赖性;而中药含药血清+5-FU组细胞Survivin蛋白的升高水平与5-FU组相比明显降低(P<0.05)。(2)作用24h、48h、72h后含药血清组HepG2细胞Caspase-3的活性无明显变化(与对照组相比,P>0.05);作用48h、72h后,5-FU组HepG2细胞Caspase-3的活性逐渐升高(与对照组相比,P<0.05);而中药含药血清+5-FU组细胞Caspase-3的活性升高更显著(与5-FU组相比,P<0.05)。结论:益气养阴解毒方含药血清可能是通过降低5-FU诱导的凋亡抑制蛋白Survivin的表达,减弱Survivin对Caspase-3活性的抑制,从而促进细胞凋亡的,这可能是本方与化疗合用增效的重要机制之一。

• 单位
  苏州大学附属第一医院; 苏州大学