基于TaqMan-MGB探针检测CYP2C19基因*2、*3和*17三个多态性位点的方法

作者：卓召振; 靳倩; 张亮亮; 匡颖; 令狐克燕^*

来源：中国医药导报, 2023, 20(07): 32-36.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.07.06

• TaqMan-MGB探针
• CYP2C19
• 单核苷酸多态性
• 细胞色素酶P450

目的建立TaqMan-MGB探针检测CYP2C19基因*2、*3和*17三个多态性位点的方法 。方法针对CYP2C19基因*2、*3和*17位点设计合成相应引物及双标记探针。选取2021年3月至2022年6月贵州省人民医院心内科门诊已知基因型的剩余全血样本42例，覆盖每个位点的每个基因型各10例，提取DNA进行聚合酶链反应(PCR)检测，产物进行电泳和Sanger法测序分析。加样1、10、100、800 ngDNA，进行PCR检测以评价灵敏度。每个位点的每个基因型5例，每周1次对其检测，连续3周，以评价重复性。结果 设计的引物扩增出目的基因片段，电泳显示明亮的单一的DNA条带；90个基因型的PCR结果与测序结果完全一致(P>0.05)；不同加样量PCR法均可准确判读基因型，所有基因型在1 ng水平的Ct值均<34。同一基因型3次重复检测的结果一致。结论 本研究成功建立了TaqMan-MGB探针检测CYP2C19基因*2、*3和*17三个多态性位点的方法，具有快速、准确、灵敏、简便的特点。

• 单位
  贵州省人民医院