分枝杆菌原生质体诱变产9-羟基-雄烯二酮菌种选育

作者：薛凯; 王荣; 王友富; 李良智; 胡翠英; 扶教龙

来源：江苏农业科学, 2017, 45(23): 288-292.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2017.23.078

• 分枝杆菌
• 原生质体诱变
• 9-OH-AD
• 菌种选育
• 液相色谱

为获得转化底物植物甾醇为9-羟基-雄烯二酮(简称9-OH-AD)的高产稳定菌株,将出发菌株分枝杆菌制备成原生质体,并对其原生质体进行定向紫外诱变筛选。结果表明,Na Cl为最佳的分枝杆菌原生质体渗透稳定剂,最适浓度为0.5 mol/L,在此条件下获得的原生质体数量为3.1×108个/m L,且最终获得1株比出发菌株9-OHAD生产量提高84.7%的菌株MS23,经传代3次,9-OH-AD的积累量分别为37.32、41.64、38.77 mg/L,具有良好的遗传稳定性。产品通过液相色谱进行确证,同时在5 L发酵罐中进行转化制备9-OH-AD的初步研究。经原生质体紫外诱变获得的遗传性稳定的9-OH-AD高产菌株可用于进一步的转化制备条件优化研究。

• 单位
  苏州科技大学